Evaluación de microbots basados en eritrocitos y nanopartículas magnéticas para el envío dirigido de genes a tumores.

Bonilla Medina, Carolina (2017) Evaluación de microbots basados en eritrocitos y nanopartículas magnéticas para el envío dirigido de genes a tumores. Maestría thesis, Universidad Autónoma de Nuevo León.

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Resumen

Los esfuerzos para el tratamiento del cáncer se han enfocado en tratar éste de una manera personalizada, con grandes avances en terapia dirigida, sin embargo, aún existen aspectos a mejorar. Actualmente, la estrategia se basa en hacer una sinergia combinando diversos enfoques generando agentes terapéuticos más eficientes. Adicional a esto, se ha buscado adaptar dichos agentes con sistemas basados en células vivas que mejoren el sistema: microbots. El objetivo del presente trabajo fue elaborar un microbot basado en eritrocitos y nanocomplejos compuestos por: NPMF nanopartículas magnéticas fluorescentes (agente focalizador y diagnóstico), quitosán (agente protector), y el plásmido pCEM-Luc, codificante para luciferasa y que contiene un promotor que permite controlar la expresión del gen en respuesta a un campo magnético externo. NPMF y el plásmido pCEM-Luc, se utilizaron para formar nanocomplejos con quitosán por gelación iónica, a distintas condiciones de pH-TPP y radio proporcional Q:pDNA. Los nanocomplejos se unieron a la membrana de eritrocitos para formar los microbots, que posteriormente fueron caracterizados por MFA y fluorescencia, para finalmente evaluar su potencial para el envío dirigido y expresión de genes en un modelo tumoral in vivo. Los nanocomplejos presentaron mejores perfiles de encapsulación y liberación de pDNA con TPP-pH3.0 y radio 60:1, forma circular ovalada, con tamaño 200-250 nm, carga superficial + 14.7 mV y muy baja citotoxicidad en células B16F10. Éstos se unieron a los eritrocitos para formar los microbots, y fueron caracterizados por FMA y fluorescencia, observando nanocomplejos fluorescentes unidos a la superficie del eritrocito. Ratones C57BL/6, con previa inducción tumoral empleando células B16F10, fueron inoculados con los microbots vía intravenosa y éstos fueron guiados a tumor, a través de un campo magnético. Posteriormente, se cuantificó fluorescencia y expresión de luciferasa en órganos y tumor post sacrificio. Los análisis in vivo demostraron el potencial de los microbots basados en eritrocitos, al poder determinar su biodistribución, así como su eficiencia de trasporte especifico y expresión génica altamente significativas (p<0.01).

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