Mutaciones “kdr” y enzimas asociadas a la resistencia a piretroides en triatominos (Hemiptera: reduviidae), vectores de la enfermedad de chagas en México.

Dávila Barboza, Jesús Antonio (2017) Mutaciones “kdr” y enzimas asociadas a la resistencia a piretroides en triatominos (Hemiptera: reduviidae), vectores de la enfermedad de chagas en México. Doctorado thesis, Universidad Autónoma de Nuevo León.

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Resumen

La forma vectorial es la principal fuente de transmisión de la enfermedad de Chagas, en esta están involucrados insectos de la subfamilia Triatominae (Hemiptera: Reduviidae). Diecinueve de las 31 especies que se encuentran en México están asociadas al humano y todas ellas son capaces de transmitir la enfermedad. Los insecticidas piretroides son recomendados para el control de estos vectores en México. En este trabajo se determino la susceptibilidad a los insecticidas deltametrina y permetrina en poblaciones de Triatoma dimidiata (Yucatán), T. pallidipennis (Morelos), T. mazzottii (Guerrero), dos poblaciones de T. longipennis (Jalisco y Guanajuato) y T. picturata (Jalisco) de México y en comparación con sus respectivas cepas de referencia así como en dos hibridos obtenidos en laboratorio. Para realizar este trabajo fue necesaria la estandarización de estas especies bajo condiciones de laboratorio similares, permitiendo esto evaluar algunos parámetros biológicos. Además de realizar la esandarización de bioensayos de aplicación tópica, la cuantificación de actividad enzimática y las bases para el análisis molecular para la determinación de mutaciónes kdr. Los bioensayos se realizaron en ambas poblaciones –silvestres y de referenciapara determinar los valores de dosis letal media (DL50). Con base en ellos se obtuvieron los valores de razón de resistencia (RR50), de acuerdo a estos valores las poblaciones de T. pallidipennis, T. mazzottii, T. longipennis y T. picturata resultaron resistentes a ambos insecticidas y solo T. dimidiata (Yucatán) fue resistente únicamente a permetrina. Ademas de confirmar la efectividad de deltametrina sobre permetrina en estas especies y poblaciones. La correlación de la actividad enzimática elevada de α-esterasas y las DL50 de deltametrina nos permite suponer que este mecanismo de desintoxicación se encuentra activo en estas poblaciones. La búsqueda de mutaciones tipo kdr dio como resultado la presencia de al menos una mutación en las poblaciones evaluadas. Las secuencias del canal de sodio dependiente de voltaje en T. dimidiata, T. pallidipennis y T. picturata mostró la mutación L1014, para T. mazzottii la mutación A943V y en ambas poblaciones de T. longipennis la presencia de la mutación K964R. Este es el primer reporte del estado de susceptibilidad en especies de triatominos vectorees de la enfermedad de Chagas en México, el hallazgo de diversos mecanismos de resistencia activos como la desintoxicacion por α-esterasas y la presencia de las mutaciones kdr nos da un posible panorama del estado actual de estos vectores en el país, estos resultados nos hacen suponer que es necesario la implementación de un programa de monitoreo de la resistencia a insecticidas en estos vectores de la enfermedad de Chagas. ABSTRACT The vector form is the principal source of transmission of Chagas disease, which involves insects of the subfamily Triatominae (Hemiptera: Reduviidae). Nineteen of the 31 species that occur in Mexico are associated with humans, and all are capable of transmitting the disease. Pyrethroids are the insecticides recommended for the control of these vectors in Mexico. We determined the susceptibility to the pyrethroid deltamethrin of peridomestic populations of Triatoma dimidiata, T. pallidipennis T. mazzottii, T. longipennis and T. picturata collected from different regions in Mexico in comparison with a reference strain for each species. To perform this work, it was necessary to standardize these species under similar laboratory conditions, allowing this to evaluate some biological parameters. In addition to performing the standardization of bioassays for topical application, the quantification of enzymatic activity and the bases for molecular analysis for the determination of kdr mutations. Bioassays were performed for the determination of the LD50 for both field populations and reference strains. According to the RR50 values, all populations demonstrated altered susceptibility to deltamethrin, with the highest RR50 for T. mazzottii of 27-fold. There was significantly increased activity of α-esterases in field populations in comparison with its corresponding reference strain. The results of the search of kdr mutations related to the resistance to deltamethrin in the evaluated species show the presence of at least one mutation in the field populations, as is the case with individuals of T. dimidiata, T. pallidipennis and T. picturata whose sequence shows the mutation L1014. For T. mazzottii, for which the mutation was found, A943V, and for the two populations of T. longipennis included in this study, we report the presence of the kdr mutation K964R. Evaluation of the various mechanisms involved in resistance to deltamethrin in triatomines from Mexico could guide us to the real justification for insecticide resistance monitoring. We expect that these findings will provide the basis for improvement of chemical control systems and will lead to the monitoring and management of resistance in triatomine vectors of Chagas disease in Mexico.

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