Expresión de receptores y genes de respuesta inmune innata de macrófagos murinos infectados experimentalmente con encephalitozoon cuniculi

Herrera Gutiérrez, Alicia (2019) Expresión de receptores y genes de respuesta inmune innata de macrófagos murinos infectados experimentalmente con encephalitozoon cuniculi. Maestría thesis, Universidad Autónoma de Nuevo León.

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Resumen

Este estudio evaluó diferentes receptores que pueden ser compañeros potenciales en la interacción de la célula huésped con el microsporidio Encephalitozoon cuniculi. Fueron considerados los receptores de transferrina 1 (Tfr-1), transferrina 2 (Tfr-2), receptor tipo Toll dos (Tlr-2) y el receptor tipo Toll 4 (Tlr-4). Así mismo se consideraron citocinas específicas del macrófago: la citocina quimiotáctica del macrófago uno (Mcp-1) y la citocina inflamatoria el macrófago uno (Mip-1) al ser mediadoras de la actividad inmune innata. Para ello se utilizaron macrófagos J774A.1 con una MOI de 10:1. Los macrófagos fueron expuestos a diferentes tratamientos de activación celular, con combinaciones de LPS y/o INF-γ y sin activador celular. El análisis de estos genes fue realizado mediante Reacción en Cadena de la Polimerasa en tiempo real (Q-PCR), identificando al receptor de Tfr-2 como un receptor que activa su expresión en presencia de E. cuniculi, por lo cual podría ser un importante receptor involucrado en el mecanismo de infección de la célula huésped utilizado por estos microorganismos. En experimentos adicionales se evaluó la capacidad fagocítica del macrófago con el uso de Citocalasina D, se observó que agregar el anticuerpo anti-dectina 1 (Dec-1) al cultivo celular redujo las tasas de infección por microsporidios (MØ+ E.c. + Dec-1). Estos resultados indican que dectina puede ser un receptor importante involucrado en el mecanismo de infección de la célula huésped utilizada por estos patógenos. Así mismo, la expresión del receptor de Tfr-2 puede indicar que está involucrado en la interacción de células hospedadoras con E. cuniculi. Estos resultados revelan que Tfr-2 y Dec-1 pueden estar involucrados en el proceso de invasión de E. cuniculi a la célula hospedadora, por lo que podría ser el primer estudio donde la participación de estos genes es reportada, e interferir con estos receptores podría ser la clave para combatir las infecciones causadas por este microsporidio. ABSTRACT This study evaluated different receptors that may be potential partners in the interaction of the host cell with the microsporidian Encephalitozoon cuniculi. Transferrin 1 (Tfr-1), transferrin 2 (Tfr-2), Toll two (Tlr-2) and Toll 4 (Tlr-4) type receptors were considered. Likewise, macrophage-specific cytokines were considered: the chemotactic cytokine of macrophage one (Mcp-1) and inflammatory cytokine the macrophage one (Mip-1) as mediators of innate immune activity. J774A.1 macrophages with an MOI of 10:1 were used for this. The macrophages were exposed to different cell activation treatments, with combinations of LPS and / or INF-γ and without cell activator. The analysis of these genes was performed by quantitative Polymerase Chain Reaction (Q-PCR), identifying the Tfr2 receptor as a receptor that activates its expression in the presence of E. cuniculi, so it could be an important receptor involved in the mechanism of cell infection host used by these microorganisms. In additional experiments the phagocytic capacity of the macrophage was evaluated with the use of Cytochalasin D, it was observed that adding the anti-dectin 1 antibody (Dec-1) to the cell culture reduced the rates of microsporidium infection (MØ + E.c. + Dec-1). These results indicate that dectin may be an important receptor involved in the mechanism of infection of the host cell used by these pathogens. Likewise, expression of the Tfr-2 receptor may indicate that it is involved in the interaction of host cells with E. cuniculi. These results reveal that Tfr-2 and Dec-1 may be involved in the process of invasion of E. cuniculi to the host cell, so it could be the first study where the participation of these genes is reported, and interfere with these receptors It could be the key to fighting infections caused by this microsporidium.

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