Caracterización genética de cepas de parvovirus canino presentes en el área metropolitana de Monterrey, Nuevo León

Cedillo Rosales, Domenica (2019) Caracterización genética de cepas de parvovirus canino presentes en el área metropolitana de Monterrey, Nuevo León. Maestría thesis, Universidad Autónoma de Nuevo León.

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Resumen

El Parvovirus canino (CPV) es uno de los patógenos de mayor importancia en caninos jóvenes, causando severos cuadros de gastroenteritis hemorrágicas, con altas tasas de morbilidad y mortalidad. A nivel mundial se han descrito diferentes subtipos genéticos de CPV (2, 2a, 2b y 2c) no obstante en México los estudios al respecto son escasos. El objetivo de este estudio fue caracterizar el subtipo de CPV presente en caninos de Monterrey y su área metropolitana. Para ello se analizaron 104 muestras (heces y muestras de tejidos) de caninos con problemas gastroentéricos mediante PCR y PCR anidado basado en la amplificación de un segmento de 1779 pb del gen de la proteína VP2. Se encontró que el 99.0% (103/104) de las muestras analizadas resultaron positivas para el gen VP2 del CPV. La diferenciación del subtipo de CPV fue llevada a cabo mediante análisis de RFLP a partir de 93 muestras positivas. El subtipo CPV2c fue detectado en el 82.8% (77/93) de los casos mientras el 1.0% (1/93) mostró patrones de RFLP del subtipo CPV2b. En el 16.1% (15/93) no fue posible establecer el subtipo por este método. Análisis de secuencia nucleotídica y filogenéticos del gen VP2 fueron realizados a partir de 23 muestras PCR-RFLP positivas y de 2 cepas vacunales. Los análisis filogenéticos de las muestras nos indican que el subtipo CPV2c está presente y circula en una alta frecuencia en caninos con alteraciones gastro-entéricas del área metropolitana de Monterrey, N.L. y que las cepas del CPV2c son genéticamente distintas a los subtipos incluidos en las vacunas comerciales empleadas comúnmente en esta zona. Así mismo, mediante los análisis genéticos se evidenció que los subtipos del CPV2c se distribuyen con grupos detectados en USA, Europa y México. Interesantemente, se detectó un grupo filogenético único separado del resto de los grupos previamente reportados en el subtipo CPV2c. Por otro lado, no se pudo establecer asociación (p<0.5%) entre la sintomatología clínica, edad, raza, procedencia o protocolo de vacunación y con el subtipo del CPV detectado. Abstract Canine Parvovirus (CPV) is one of the most important pathogens in dogs, causing severe cases of hemorrhagic gastroenteritis, with high morbidity and mortality rates and presents genetic subtypes (CPV2, CPV2a, CPV2b, and CPV2c). The objective of this study was to characterize the CPV-subtypes present in canines of Monterrey and its metropolitan area. For this, 104 samples (feces and tissue samples) of canines with gastroenteritis were analyzed by PCR and nested PCR based on the amplification of a 1779 bp segment of the VP2 protein gene. It was found that 99.0% (103/104) of the analyzed samples were CPV positive by PCR and nested PCR. Differentiation of the subtype of CPV was carried out by PCR-RFLP analysis from 93 CPV positive samples. The CPV2c subtype was detected in 82.8% (77/93) of the cases, while 1.0% (1/93) showed CPV2b RFLP patterns. In 16.1% (15/93) it was not possible to establish the subtype by this method. Genetic analysis of the VP2 gene were performed from 23 CPV PCR-RFLP positive samples and 2 vaccine strains. Phylogenetic analyses of the samples indicate that the CPV2c subtype is present and circulates in a high frequency in canines with gastroenteric alterations in the metropolitan area of Monterrey, N.L. and that the CPV2c strains are genetically distinct from the subtypes included in commercial vaccines commonly used in this area. Likewise, by means of the genetic analyses, it was evidenced that the subtypes of the CPV2c are distributed with groups detected in the USA, Europe, and Mexico. Interestingly, a single phylogenetic group separated from the rest of the groups previously reported in subtype CPV2c was detected. In addition, it was not possible to establish an association (p <0.5%) between the clinical symptomatology, age, race, origin or vaccination protocol with the CPV-subtype detected.

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