Efecto del TNF-α e IL-1β en la expresión de IL-10 vía WT1 en células de carcinoma de pulmón humano A549

Izaguirre Álvarez, Juan Manuel (2020) Efecto del TNF-α e IL-1β en la expresión de IL-10 vía WT1 en células de carcinoma de pulmón humano A549. Maestría thesis, Universidad Autónoma de Nuevo León.

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Resumen

El cáncer pulmonar resalta entre las enfermedades que causan un mayor número de defunciones a nivel mundial y catalogándose en México como la primera causa de muerte por tumores malignos. Se ha asociado una alta expresión de WT1 con la prevalencia de un microambiente anti-inflamatorio en estadios avanzados, resaltando la presencia de la IL-10 y baja expresión de citocinas inflamatorias. Por ello el objetivo de esta investigación fue determinar si existe una regulación de la IL-10 con relación a WT1 y si citocinas inflamatorias como TNF-α e IL-1β pueden modular la expresión y localización de WT1. Células A549 fueron tratadas con TNF-α e IL-1β, el ensayo de RT-PCR permitió observar un incremento de transcritos de WT1, así como una disminución del mRNA de la IL-10. Se demostró una disminución de la proteína WT1 y su traslocación del núcleo al citoplasma por el ensayo de inmunofluorescencia además, por el ensayo de MTT se observó que los tratamientos con TNF-α e IL-1β comprometen la viabilidad de esta línea. De la misma manera, por el ensayo de MTT se determinó la dosis letal media de un RNAiWT1 en las células A549, siendo de 0.27μg/mL. Estos datos indican que las citocinas comprometen la viabilidad en células de adenocarcinoma pulmonar por la disminución de la expresión de la proteína WT1, además de la pérdida de su función de factor transcripcional al ser traslocada hacia el citoplasma. La dependencia de la línea A549 hacia WT1 para su viabilidad se comprobó mediante el silenciamiento con un RNAi-WT1, el efecto negativo de TNF-α e IL-1β sobre WT1 se vio reflejado en la disminución de los transcritos de la IL-10, demostrando así su asociación en esta línea celular.

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