Caracterización del agente etiológico de la necrosis hepatopancreatica (nhp) y su impacto en cultivos de camarón Litopenaeus vannamei en Sonora, México

Ibarra Gámez, José Cuauhtémoc (2006) Caracterización del agente etiológico de la necrosis hepatopancreatica (nhp) y su impacto en cultivos de camarón Litopenaeus vannamei en Sonora, México. Doctorado thesis, Universidad Autónoma de Nuevo León.

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Resumen

La necrosis hepatopancreatica (NHP) es una seria enfermedad que afecta los cultivos de camarón Litopenaeus vannamei Boone, 1931, desde Texas hasta Centro y Sudamérica. En este trabajo se realizó el primer monitoreo sistemático durante el ciclo 2004 en seis granjas de Sonora, debido a la falta de estudios sobre infecciones causadas por rickettsias en L. vannamei. El diagnóstico presuntivo se efectuó por microscopia de luz (ML, análisis en fresco y cortes histológicos con hematoxilina y eosina) y el confirmativo se basó en el aislamiento de la bacteria por gradientes de Percoll, reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y tinciones negativas al microscopio electrónico de transmisión (MET), para diferenciar esta de la vibriosis. Por ML, los hepatopancreas presentaron atrofia, estrangulamiento y necrosis en túbulos hepatopancreáticos con masas de bacterias NHP, infiltración hemocitica y melanizacion. Por PCR se amplificaron productos de 209 pb correspondientes a una región específica del 16S rDNA de la rickettsia NHP. Al MET, se registró la presencia de bacterias pleomorficas, ovoides a cilíndricas (0.2 μm de ancho x 0.6 μm a 0.9 μm de longitud), con menor frecuencia se presentaron formas helicoidales, con siete a doce giros o torciones (0.23 μm x 2.43 a 5.27 µm). La aplicación de herramientas de diagnóstico tradicional y molecular, permitieron identificar con certeza al agente causal de las epizootias en Sonora como la bacteria NHP y descartar etiologías similares como las ocasionadas por bacterias del genero Vibrio. Las prevalencias mas altas se observaron en la granja Lombardo Acuícola (86%) y la mas baja en Accion Acuícola (14.2 %), con salinidades entre 42 a 45.5 ppt. Abstract Necrotizing Hepatopancreatitis (NHP) is a severe disease of farm raised white shrimp, Litopenaeus vannamei Boone, 1931 from Texas to Central and South America. On this study, the first systematic monitoring for NHP in six shrimp farms located in Sonora was performed during the 2004 culture cycle, mainly by the scarcity of studies over rickettsial infections in L. vannamei. Presumptive diagnosis was based in light microscopy (LM, wet-mounts and H&E stained sections of hepatopancreata) while confirmative identification were realized by isolation of the bacteria in Percoll gradients, polymerase chain reaction (PCR) and negative stains for transmission electron microscopy (TEM), looking for differentiate NHP from bacteria genus vibrio. By ML, atrophy of the hepatopancreas, necrosis of the hepatopancreatic tubules filled with masses of the NHP bacterium within the tubular epithelium, together with hemocytic infiltrates and tubular melanization were observed. By PCR, products of 209 bp, which correspond to a specific region of 16S rDNA of the rickettsia NHP were amplified. By TEM, pleomorphic ovoid to rod-shaped bacteria (0.2 x 0.6-0.9 m) and helical forms with seven to twelve spiral turns (0.23 x 2.43-5.27 m), were observed. Application of traditional and molecular diagnostic tools, allowed to identify exactly the causative agent of the epizootic mortalities as the bacterium NHP, whth higher prevalence registered in Lombardo Acuícola (86 %) and lower in Accion Acuícola (14.6 %), where the salinities reached 42 to 45.5 ppt.

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