Efecto bactericida de nanopartículas de plata sobre microorganimos resistentes a los antibióticos in vitro

Jerez Urriolagoitia, Mónica Marcela (2007) Efecto bactericida de nanopartículas de plata sobre microorganimos resistentes a los antibióticos in vitro. Maestría thesis, Universidad Autónoma de Nuevo León.

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Resumen

La emergencia de cepas bacterianas resistentes a los antimicrobianos constituye un problema de distribución mundial y cada vez es más difícil combatir a este tipo de microorganismos, por esta razón surge la necesidad de encontrar otras alternativas para el tratamiento de estas infecciones. En base a las propiedades bactericidas de los compuestos de plata (Ag+) ampliamente conocidas y a las características físicas y químicas únicas que presentan los materiales obtenidos por Nanotecnología (nanomateriales), varias investigaciones han reportado las propiedades antibacterianas de las nanopartículas de plata. En este trabajo se determinó el efecto bactericida de las nanopartículas de plata (NPP) sobre bacterias resistentes a los antibióticos in vitro, se utilizaron cuatro cepas bacterianas: Staphylococcus aureus resistente a Meticilina (MRSA), Streptococcus pyogenes resistente a Eritromicina (SPRE), Escherichia coli O157: H7 resistente a Ampicilina y Pseudomona aeruginosa multirresistente. La CIM de estos compuestos sobre cada bacteria fue determinada por el método de dilución en tubo y el de microdilución en placa, la CBM fue establecida a través del método de la capacidad formadora de colonias (CFC) y las pruebas de viabilidad celular de MTT y Bioluminiscencia. Los resultados obtenidos mostraron un efecto bactericida de las nanopartículas de plata sobre las cuatro cepas bacterianas independientemente de su resistencia a los antibióticos a una concentración mínima de 25 µg/ml en el caso de las bacterias Gram positivas y de 12.5 µg/ml para las bacterias Gram negativas, el efecto antibacteriano fue dependiente de la concentración de NPP utilizadas y del número de UFC bacterianas que se expusieron a ellas, como se esperaba a menores concentraciones bacterianas menores concentraciones de NPP fueron necesarias para producir un efecto bactericida. Entre 2 y 8 horas de tratamiento fueron suficientes para conseguir el 100% de inhibición del inóculo estandarizado de MRSA con 100, 50 y 25 µg/ml de NPP respectivamente. Finalmente el efecto bactericida de las NPP sobre MRSA fue comparado con el de la Vancomicina, cuya diferencia entre ellos fue significativa (P<0.05). Abstract The emergency of antibiotic-resistant strains constitutes a world problem and the combat against these microorganisms is more difficult today, that’s why to find others alternatives therapies is very necessary. In base of many researches it is known the silver (Ag+) has bactericidal properties and the materials obtained by Nanotechnology (nanomaterials) present unique physical and chemical properties. In addition the antibacterial properties of silver nanoparticles had been reported in a lot of scientific articles. The in vitro bactericidal effect of Silver Nanoparticles against antibiotic-resistant bacteria was determined in this thesis, four bacterial strains were used: methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA), erythromycin resistant Streptococcus pyogenes (ERSP), ampicillin resistant Escherichia coli O157: H7 and multidrugs-resistant Pseudomona aeruginosa. In order to determine the MIC of silver nanoparticles against each strain, the macro-dilution in tube and micro-dilution in plaque methods were used, the MBC was determined estimating the number of bacteria on a solid surface and the cell viability after treatment was established using the MTT and Bioluminescence assays. The results showed a bactercidal effect of silver nanoparticles against the four bacteria proved, this effect was independent of resistance features to antibiotics, the minimum bactericidal concentration was 25 µg/ml and 12.5 µg/ml for Gram positives and Gram negatives bacteria respectively, the antibacterial effect was dependent as the concentration of nanoparticles as number of UFC used, how was expected for fewer bacterial concentrations, fewer concentrations of silver nanoparticles were used in order to get a bactericidal effect. The results obtained in the bacterial death curves showed that between two and eight hours of incubation were enough for getting 100% of inhibition of standardized inoculums of MRSA with 100, 50 and 25 µg/ml of nanoparticles respectively. Finally the bactericidal effect of silver nanoparticles was compared with vancomicine and the results found were significantly different (P<0.05).

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