Efectividad antibiofilm de un hidrogel cargado con nanopartículas lipofílicas de bismuto sobre el biofilm de Enterococcus faecalis intraconducto

Martínez Martínez, Marco Antonio (2018) Efectividad antibiofilm de un hidrogel cargado con nanopartículas lipofílicas de bismuto sobre el biofilm de Enterococcus faecalis intraconducto. Maestría thesis, Universidad Autónoma de Nuevo León.

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Resumen

Una de las principales metas del tratamiento endodóntico es eliminar a todos los microorganismos que colonizan la cámara pulpar y conducto radicular. El objetivo de este trabajo fue evaluar la actividad antibiofilm de un hidrogel cargado con nanopartículas de bismuto sobre el biofilm de Enterococcus faecalis intraconducto. Se obtuvo un biofilm de E. faecalis intraconducto de 21 días (3 semanas) in vitro y se caracterizó por microscopía electrónica de barrido (SEM) y microscopía de fluorescencia (MF). El biofilm obtenido se expuso al hidrogel con nanopartículas BisBAL 1000 µM, hipoclorito de sodio, hidróxido de calcio o nada durante 10 min., 24 hrs, 48 hrs., 72 hrs. y se observó mediante SEM y MF, cuantificando la viabilidad celular. Dentro de los resultados obtenidos las imágenes de MF muestran que después de 24h de tratamiento con el Gel-BisBAL NPs se removió el 99% del biofilm formado por E. faecalis, mientras que el hidróxido de calcio removió solo el 16% y el gel solo sin nanopartículas no tuvo efecto. Las imágenes de MF muestran que después de 24h de tratamiento con el hidrogel-BisBAL NPs se removió el 99% del biofilm formado por E. faecalis, mientras que el hidróxido de calcio removió solo el 16% y el gel solo sin nanopartículas no tuvo efecto. Estos resultados fueron muy similares tanto en placas de poliestireno de 96-pozos como en el modelo de biofilm intraconducto. La detección por PCR del DNA bacteriano apoyo los resultados obtenidos previamente corroborando la propiedad antibiofilm del hidrogel-BisBAL NPs, constituyendo una alternativa innovadora para el tratamiento de las infecciones endodónticas. ABSTRACT One of main goals of endodontic treatment is to eliminate all microorganisms colonizing pulp chamber and root canal. The objective of this work was to develop a hydrogel loaded with bismuth lipophilic nanoparticles and evaluate its antimicrobial and antibiofilm effectiveness to inhibit and detach the E. faecalis biofilm. The antibiofilm activity of BisBAL NPs-Gel was determined by using a Drip Flow Modified Method on root canal to develop an E. faecalis biofilm of 21 days of formation, which was characterized by scanning electron and fluorescence microscopies. Additionally the bacterial DNA specific of E. faecalis was detected bv PCR and electrophoresis by using the DNA extracted from a radicular scraping after the experimental treatment. The obtained results show that after 24h of treatment with 1000µM of BisBAL NPs-Gel detached 99% of the bacterial biofilm, reducing the E. faecalis biofilm ten times in comparison with calcium hydroxide. (common treatment) when E. faecalis DNA was detected by PCR in samples extracted from root canal. These results were identical when 96-well plate was used as in vitro biofilm experiments employing same strain of E. faecalis. In summary, here we present evidence for first time of clinical effectiveness of a hydrogel loaded with bismuth lipophilic nanoparticles being much better than traditional treatment (calcium hydroxide) therefore it is an interesting alternative to fight endodontic infections.

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