Mecanismos de resistencia y perfil de expresion de genes involucrados en la resistencia a la deltametrina en poblaciones de Aedes aegypti (L.) (Diptera: Culicidae) en México

Contreras Perera, Yamili Jazmin (2020) Mecanismos de resistencia y perfil de expresion de genes involucrados en la resistencia a la deltametrina en poblaciones de Aedes aegypti (L.) (Diptera: Culicidae) en México. Doctorado thesis, Universidad Autónoma de Nuevo León.

Vista previa

Texto 1080314454.pdf - Versión Aceptada Available under License Creative Commons Attribution Non-commercial No Derivatives. Download (1MB) | Vista previa

Resumen

La exposición prolongada a insecticidas, presiona y selecciona poblaciones de mosquitos altamente resistentes. En este estudio se determinaron los parámetros de susceptibilidad a deltametrina CK50 y CL50 en seis poblaciones de Aedes aegypti a través de cinco generaciones de selección, así mismo, se determinó la heredabilidad de la resitencia a deltametrina (h2) con el conjunto de parámetros obtenidos (CK50 y CL50). La frecuencia de las mutaciones kdr V410L, V1016I y F1534C y los niveles de actividad de tres familias de enzimas (esterasas [α y β], oxidasas de función mixta y glutatión S-transferasas) relacionadas con la desintoxicación a insecticidas fueron determinados en cada generación. Finalmente comparamos los niveles de expresión de genes que confieren resistencia. Nuestros resultados señalan un incremnento en los valores de CK50 y CL50 despues de la selección con deltametrina (FS5 vs FS0). De acuerdo con los factores de resistencia (FR), obtuvimos incrementos de 1.5 a 5.6 veces para CL50 y 1.3-3.8 veces para CK50. Los individuos triple homocigoto resistentes (tri-locus, LL / II / CC) estuvieron presentes en la generación parental y aumentaron en frecuencia después de la selección con deltamertina. La frecuencia de L410 aumentó de 1.18 a 2.63, I1016 se entre 1.19 y 2.79 veces, y C1534 se fijó en todas las cepas después de la selección con deltametrina. La actividad enzimática varió significativamente durante las generaciones de selección. Sin embargo, α y β esterasas permanecieron alteradas en algunas poblaciones y solamente dos mostraron un incremento en los niveles medios de actividad de GST después de la selección con deltametrina. Los genes diferencialmente expresados fueron agrupados en 12 categorías. Los genes de cutícula (CUT) fueron los más sobreexpresados después de la selección con deltametrina. Los elevados parámetros de susceptibilidad y su asociación con altas frecuencias de mutaciones kdr (V410L, V1016I y F1534C), así como, la sobreexpresión de genes de cutícula (CUT) sugieren un papel importante en la resistencia a la deltametrina. Con base a estos resultados, destacamos la necesidad de implementar estrategias que involucren el monitoreo de frecuencias kdr y profundizar en el análisis de la morfología y composición cuticular en Aedes aegypti y asociación de estos genes en la resistencia cuticular a piretroides. Abstract Prolonged exposure to insecticides, press and select populations of mosquitoes highly resistant. In this study the parameters of susceptibility to deltamethrin KC50 and LC50 were determined in six natural populations of Aedes aegypti through five generations of selection, the set of parameters obtained (KC50 and LC50) was subjected to heritability analysis of resistance (h2). Likewise, the frequency of the kdr mutations V410L, V1016I, F1534C and the activity levels of three enzyme families (esterases [α and β], mixed function oxidases and glutathione S-transferases) related to insecticide detoxification were determined in each generation. Finally, we compare the expression levels of genes that confer resistance. Our results indicate an increase in the values of KC50 and LC50 after selection with deltamethrin (FS5 vs FS0). According to the resistance factors (FR), we obtained increments of 1.5 to 5.6 times for LC50 and 1.3-3.8 times for KC50. Triple homozygous resistant individuals (trilocus, LL/II / CC) were present in the parental generation and increased in frequency after selection with deltamertin. The frequency of L410 increased from 1.18 to 2.63 for V1016 an increase was observed between 1.19 and 2.79 times, and C1534 was fixed in all strains after deltamethrin selection. Enzymatic activity varied significantly during the generations of selection. However, only α and β esterases remained altered in some of the populations and only two populations showed an increase in the average levels of GST activity after selection with deltamethrin. Differentially expressed genes were grouped into 12 categories. The cuticle genes (CUT) were the most overexpressed after selection with deltamethrin. The high susceptibility parameters and their association with high frequencies of kdr mutations (V410L, V1016I and F1534C), as well as cuticle gene overexpression (CUT) suggest an important role in resistance to deltamethrin. Based on these results, we highlight the need to implement strategies that involve monitoring of kdr frequencies and deepen the analysis of the morphology and cuticular composition in Aedes aegypti and association of these genes in pyrethroid cuticular resistance.

Actions (login required)

Ver elemento