La actividad transcripcional de Antp es modulada por la formación de los complejos triméricos Antp-TBP-TFIIEβ y Antp-TBP-Exd, pero por el complejo Antp-TBP-BIP2

Hernández Bautista, Norma Carolina (2020) La actividad transcripcional de Antp es modulada por la formación de los complejos triméricos Antp-TBP-TFIIEβ y Antp-TBP-Exd, pero por el complejo Antp-TBP-BIP2. Maestría thesis, Universidad Autónoma de Nuevo León.

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Resumen

Las homeoproteínas presentan estructuras tan similares y reconocen secuencias de DNA prácticamente idénticas, por lo cual es necesario determinar el mecanismo funcional que les permite llevar a cabo la regulación de la expresión de los genes del desarrollo en el lugar y momento apropiado. Comparaciones realizadas entre las secuencias codificantes de los genes de estas proteínas han mostrado, que comparten dominios altamente conservados como el homeodominio (HD), el tetrapéptido YPWM y regiones Poly-Q. Se ha demostrado que la homeoproteína Antennapedia puede establecer interacciones diméricas con cofactores y factores transcripcionales como TBP, TFIIEβ, BIP2, Exd, Scr y Ubx; sin embargo, estás interacciones no logran explicar cómo se lleva a cabo la regulación transcripcional. Más recientemente hemos comprobado que Antp puede formar complejo con más de un factor, como se confirmó mediante FRET-BiFC, Antp-TBP forman complejos triméricos con TFIIEβ, Exd y BIP2. Debido a que se desconoce el papel que tiene las interacciones multiprotéicas en la regulación, en este trabajo de tesis analizamos la actividad transcripcional de los complejos triméricos de Antp-TBP-TFIIEβ Antp-TBP-Exd y Antp-TBP-BIP2. La estrategia experimental consistió en ensayos de transactivación, en realizados mediante transfecciones de los plásmidos productores de Antp con los factores TBP, TFIIEβ, Exd y BIP2 para determinar el efecto de estos complejos en la actividad transcripcional de Antp. Los resultados obtenidos muestran que la interacción trimérica de Antp-TBP-TFIIEβ incrementa de manera altamente significativa la actividad transactivadora de Antp en un 138%. En contraste, Antp-TBPExd muestra un rescate parcial (80%) de la transcripción en comparación con loscomplejos diméricos Antp-TBP (73%) y Antp-Exd (61%). Sin embargo, con el complejo trimérico de Antp-TBP-BIP2 obtuvimos una disminución significativa de la capacidad transactivadora de Antp (26%). También logramos determinar los dominios funcionales involucrados en la actividad transcripcional de Antp en el complejo Antp-TBP-TFIIEβ, así como también la importancia que tiene el motivo YPWM en las interacciones de Antp con TBP-Exd y TBP-BIP2 Los resultados reportados en la transactivación por las interacciones triméricas abre la posibilidad de analizar el efecto funcional en la regulación génica in vivo en Drosophila melanogaster.

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